遺伝子検査のススメ

PCR実験の手引き
PCRの原理や基礎知識とともに、実際に実験を行う際のポイントについて紹介します。

リアルタイムPCRによる遺伝子迅速検出
リアルタイムPCRの原理や基礎知識とともに、リアルタイムPCRにより病原微生物や食品・環境・感染症関連の遺伝子検出を行った例をご紹介します。

■レジオネラ属菌遺伝子検査法
生菌死菌検出法（qPCR）
令和元年9月19日に、厚生労働省医薬・生活衛生局生活衛生課長通知「公衆浴場における浴槽水等のレジオネラ属菌検査方法について」（薬生衛発0919第1号）が発出されました。これは、基準項目の一つであるレジオネラ属菌の具体的な検査方法に言及されたもので、従来の培養検査法に加えて、迅速検査法（遺伝子検査法）のLC EMA-qPCR法とqPCR法が記載されました。ただし、各自治体の条例等では公衆浴場のレジオネラ検査は培養法が規定されており、PCR法の結果は補助的に用いられます。
生菌検出法（LC EMA-qPCR）

生菌検出法（EMA-qPCR）
令和6年9月に改訂発行された「第5版レジオネラ症防止指針」（公益財団法人日本建築衛生管理教育センター）には上記LC EMA-qPCR法、qPCR法に加えてEMA-qPCR法も収載されています。

■クリプトスポリジウム・ジアルジア遺伝子検査
リアルタイムPCRによるクリプトスポリジウム、ジアルジア検出
Cycleave RT-PCR Cryptosporidium (18S rRNA) Detection KitまたはCycleave RT-PCR Giardia (18S rRNA) Detection Kitを用いたクリプトスポリジウム、ジアルジアの検出について、厚生労働省通知の内容を含め、前処理から検出・解析までをご紹介します。

PCR/qPCRによる生菌由来DNAの選択的検出
EMA-PCR法を用いた生菌由来DNAの選択的検出について、原理やグラム陰性菌用、グラム陽性菌用のViable Bacteria Selection Kit for PCRを使用した操作方法、解析結果について紹介します。