オンライン設計・注文方法について

ログインからSNP検出用（1塩基置換）プライマー・プローブの設計、オンライン注文について順を追って説明します。

I. ログイン

CycleavePCR Assay Designer (SNPs)を利用するには“タカラバイオWEB会員”に登録が必要です（無料）。
会員登録することでCycleavePCR Assay Designer (SNPs)の利用だけでなく他のWEBサービスもご利用できるようになり、オンライン注文もスムーズに行えるようになります。
ログイン画面
  1. 【ログイン】ボタンをクリックするとログイン画面が開きます。
  2. 未登録の方は【会員登録】ボタンをクリックして会員登録を行ってください。
  3. 登録されたユーザーIDとパスワードを入力します。【ログイン】ボタンをクリックするとCycleavePCR Assay Designer (SNPs)の条件設定画面が開きます。
    ※ SSL通信では通信内容が暗号化され、セキュリティー上安心してサービスをご利用いただけますのでお勧めいたします。

II. 条件設定

SNP検出用(1塩基置換)プライマー・プローブの設計に必要な情報を設定します。
  1. 名前の設定
    プライマー・プローブセットの名前もしくは検索に対する名前を設定します。
    使える文字は英数字、"-(ハイフン)"、"_(アンダーバー)" で11文字以内です。
    名前の設定画面
  2. 対象配列の指定
    SNP位置を含む設計対象の配列を指定します。 直接記入あるいはコピー＆ペーストで設計対象配列を入力ウインドウに入力するか、【参照】ボタンをクリックし配列を記載したファイルを選択し、アップロードすることで配列を指定することができます。 配列については以下の点にご注意ください。
    • 配列はFasta形式もしくは、配列部分だけ（タイトルを含まない）のテキスト形式
    • 検出対象のSNP位置の塩基のかわりに*(アスタリクス)を記載する。*(アスタリクス)の設定は1ヵ所のみ有効です。
    • 配列長は100～1,000塩基にしてください。
    • 配列中のスペース、数字は無視されます。
    • a, g, t, c, A, G, T, C, スペース、数字以外の文字が存在する場合はエラーになります。
    • 配列は1配列のみ入力可能です。複数配列、Multi fastaには対応していません。
      設計対象の配列指定画面
  3. SNP site(*)の塩基を指定
    SNP site(*)の塩基が何かをプルダウンメニューより選択します。
    SNP siteの塩基指定画面
  4. 設計開始
    【Design】ボタンをクリックすると設計を開始します。設計状況は画面右側の「過去の設計情報」に表示されます。
    設計が完了するとInformationに【設計完了】が表示されます。
    設計に要する時間はSNP site(*)で2塩基を選ぶと長くなり、サーバーの使用状況により変動します。通常1～15分程度で完了します。
    設計中に新たに別の設計を始めることも可能です。Nameをクリックすると、設計に用いた対象配列が表示されます。
    過去の設計情報画面

III. 設計結果

Informationの【設計完了】をクリックすると設計結果表示画面が開きます。
設計結果表示画面
設計結果としてプライマー、プローブのセットが最大３セット、プローブは各セットにおいて1ないし2配列提示されます。 その中から、ご希望のセットについてProbeのReporter標識を選択し、Cart Inをクリックします。
プローブ名は、ご指定されたSNP塩基を付加しています。プローブ配列の大文字はSNPサイト、( )内はRNAであることを示します。

【Reporter標識】
それぞれのプローブを標識する蛍光色素を選択します。

標識の選択について
ご使用になるリアルタイムPCR装置によって選択するReporter標識が異なります。

・1波長検出の場合は、FAM標識を推奨します。

・2波長検出の場合は、1波長には、FAM標識を選択し、もう1波長については、使用するリアルタイムPCR装置の検出可能な蛍光物質(ROXまたはHEX)を選択してください。

・Life Technologies製リアルタイムPCR装置（例：Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System、StepOnePlus Real-Time PCR System） で2波長検出の場合、ROX Reference Dye/ROX Reference Dye IIを使用の上で、FAM標識とHEX標識を選択し、HEX標識はVIC用フィルターで検出してください。


【Alignment】
ボタンをクリックするとPCR増幅産物、プライマー、プローブのAlignmentが表示されます。
【Cart In】
ご希望のプライマー・プローブセットをカートに入れることができます。
カートに入れたプライマー・プローブセットが購入候補となります。この段階で発注となるわけではありません。
【カートへ】
カートの情報を見ることができます。選択したプライマー・プローブセットの購入はこちらから行います。

IV. カート情報

【Cart In】ボタンでカートに入れたプライマー・プローブセットを見ることができます。
ご購入される数量を設定し、レジへお進みください。Nameは適宜変更が可能です。
カート情報表示画面
【数量】注文したいセット数を選択します。
【削除】カートに入っているプライマー・プローブセットを削除することができます。
【レジへ】オンライン注文フローへと進みます。

V . 「Cycleave Design注文内容確認」画面

ご注文内容をご確認いただく画面です。
Cycleave Design注文内容確認画面
価格は送料込み、消費税別の金額です。 納期は約3週間です。（合成および輸送の事情で若干前後する可能性があります。）

表示内容に間違いが無ければ「次へ」ボタンをクリックしてください。
内容を訂正したい場合は「戻る」ボタンをクリックしてカート情報画面で修正を行ってください。

VI . 「ご連絡先・お届け先確認」

ご連絡先を確認し、製品のお届け先をご選択ください。
ご連絡先・お届け先確認画面
  1. ご連絡先にはWEB会員登録の情報が表示されます。この欄の販売店より代金のご請求をさせていただきます。
  2. ご本人の登録ご住所にお届けの場合は「上記の登録住所へお届け」を選択してください。
  3. タカラバイオ指定の販売店にお送りする場合は「上記の販売店へお届け」を選択して、「販売店一覧」より選択してください。その際は販売店のご担当者名もご入力ください。ご不明の際は「不明」を選択してください。
  4. ご登録以外の納入業者またはご住所にお届けの場合は、必要事項の入力をお願いします。
【次へ】ボタンをクリックすると、「注文最終確認画面」へと進みます。

VII. 「注文最終確認画面」

最終確認です。【注文する】ボタンをクリックすると注文が確定し、処理を完了します。
注文最終確認画面

VIII. ご注文内容確認のメールについて

ご注文いただきますと、登録メールアドレスに注文確認メールが届きます。もし確認メールが届かなかった場合はなんらかの障害が考えられますので、その際は下記までお問い合わせください。
タカラバイオ お問い合わせ窓口
TEL：077-565-6999